IMUNOFLUORÊSCENCIA

• O MATERIAL DEVE SER ENVIADO EM MEIO ESPECIAL (MICHEL), NÃO EM FORMOL
• IDENTIFICA IMUNODEPÓSITOS NOS TECIDOS ENVOLVIDOS, ISTO É: MARCA OU NÃO AUTO ANTICORPOS NOS VASOS, ZMB E SUPERFICIE CELULAR NA IMUNOFLUORESCENCIA DIRETA.
• OS AUTO ANTICORPOS PODEM SER IDENTIFICADOS NO SANGUE ATRAVÉS DA IMUNOFLUORESCENCIA INDIRETA.
• IMPORTANTE MÉTODO COMPLEMENTAR NAS DERMATOSES BOLHOSAS

A) DIRETA

• DETECTA AUTO ANTICORPOS NA PELE PERILESIONAL OU LESADA
• É USADA NAS DERMATOSES BOLHOSAS AUTO IMUNES, PORFIRIA CUTANEA TARDA, LIQUEN PLANO, VASCULITES E COLAGENOSES
• PELE DO PACIENTE + ANTICORPO CONJUGADO COM FLUORESCEÍNA
• A  AMOSTRA É SUBMETIDA  A DIVERSOS CORTES HISTOLÓGICOS, CADA CORTE RECEBERÁ 1 ANTICORPO CONJUGADO À FLUORESCEÍNA DIFERENTE
• OU SEJA, SÃO REALIZADOS REAÇÕES SERIADAS, CADA UMA EM UMA LAMINA DIFERENTE, USANDO  ANTI-IgA OU ANTI-IgG OU  ANTI-IgM OU  ANTI-C3 OU ANTIFIBRINOGÊNIO. TODOS CONJUGADOS COM FLUORESCEÍNA.

B) INDIRETA:

• PELE NORMAL + SORO DO PACIENTE ( ANTICORPO PRIMÁRIO) + ANTICORPO SECUNDÁRIO LIGADO À FLUORESCEÍNA
• SALT SPLIT SKIN: 
• PROVOCA-SE UMA BOLHA NA LAMINA LÚCIDA DE UMA PELE SAUDÁVEL AO DEIXÁ-LA POR 72H EM SOLUÇÃO SALINA 1 MOLAR (NaCl), 4C.
• USA-SE O SORO DO PACIENTE, POR ISSO DETECTA AUTO ANTICORPOS CIRCULANTES QUE IRÃO SE DEPOSITAR NO LADO DÉRMICO OU EPIDÉRMICO DA “BOLHA ARTIFICIAL”
• ANTÍGENOS DO PB ESTÃO LOCALIZADOS NO HEMIDESMOSSOMOS (BP230) OU NA LAMINA LÚCIDA (BP180)
•   USADA PARA A MELHOR DIFERENCIAÇÃO DE BOLHAS SUBEPIDÉRMICAS OU IDENTIFICAÇÃO DE AUTO ANTICORPOS CIRCULANTES

C) IMUNOMAPEAMENTO:

• É O MÉTODO MAIS UTILIZADO PARA IDENTIFICAR DIFERENTES TIPOS DE EPIDERMÓLISES BOLHOSAS HEREDITÁRIAS, ATRAVÉS DO MAPEAMENTO DOS ANTÍGENOS DA ZMB. 
• É UM BOM MÉTODO ALTERNATIVO À MICROSCOPIA ELETRONICA, POIS É MAIS RÁPIDO E É MAIS VANTAJOSO NA DIFERENCIAÇÃO DAS EPIDERMÓLISES BOLHOSAS DISTRÓFICAS.
• É UMA IMUNOFLUORESCENCIA INDIRETA REALIZADA NA PELE DO PACIENTE COM BOLHA ÍNTEGRA.
• UTILIZA-SE ANTICORPOS QUE REAGEM COM OS SEGUINTES ANTÍGENOS DA ZMB: 

• ANTÍGENO PB230, LOCALIZADO NO HEMIDESMOSSOMOS
• LAMININA, LOCALIZADA NA LAMINA LÚCIDA
• COLÁGENO IV, LOCALIZADO NA LAMINA DENSA
• COLÁGENO VII, LOCALIZADO NAS FIBRILAS DE ANCORAGEM NA SUBLAMINA DENSA
• AS MARCAÇÕES SÃO:



• EB SIMPLES: TODOS ANTICORPOS NO SOALHO DA BOLHA
• EB JUNCIONAL: ANTICORPOS CONTRA COLAGENO IV E VII MARCAM O SOALHO, O ANTICORPO CONTRA PB230 NO TETO, OS ANTICORPOS ANTI LAMININA TEM MARCAÇÃO INDIFERENTE
• EB DISTRÓFICA: TODOS OS ANTICORPOS MARCAM O TETO, O ANTICORPO CONTRA COLÁGENO VII TEM MARCAÇÃO NO TETO OU SOALHO